Целеустремленный и оптимистичный Марио с детства неразлучен со своим младшим братом, робким и застенчивым Луиджи, которого всегда защищал от хулиганов. Оба уходят от своего прежнего работодателя, чтобы открыть собственный сантехнический бизнес в Бруклине, потратив все сбережения на рекламный ролик. Однажды Марио и Луиджи спускаются в подземные коммуникации, чтобы починить водопровод, где неожиданно попадают через таинственную трубу в фантастическое Грибное королевство. Там главные герои втягиваются в невероятные приключения по спасению принцессы Пич от злобного Боузера.